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人GAPDH基因荧光定量PCR试剂盒说明 - 人生就是博-尊龙凯时

来源:戴欢邦 日期:2025-07-24

人生就是博-尊龙凯时推出的检测试剂盒是基于探针法荧光定量PCR原理开发的,具备以下显著特点:

人GAPDH基因荧光定量PCR试剂盒说明 - 人生就是博-尊龙凯时

1. 即开即用:用户只需提供样品DNA模板即可开始实验。

2. 高灵敏度:特有的引物及其他组分经过优化,能有效提高检测的敏感性。

3. 阳性对照:本产品提供阳性对照,使用户便于甄别假阴性样品。

4. 高特异性:引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列中的高度保守区域,保证不与其他生物样本的DNA产生交叉反应。

5. 定性与定量检测兼容:本试剂盒不仅可用于定性检测,还支持定量检测,线性范围可达5个数量级。

6. 充足的反应次数:产品为50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应提供了足够的试剂。

7. 科研使用限定:本产品仅限于科研领域使用。

方法:

一、DNA提取(样本制备区):使用自选方法提取和纯化样品DNA,本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品(样本制备区):

  1. 标记6个离心管,分别标记为7,6,5,4,3,2。
  2. 向管中加入45μL DEPC-H2O,并使用带芯枪头以避免交叉污染。
  3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照,充分震荡1分钟,得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品。
  4. 重复上述稀释流程,直到获得6个不同稀释度的标准曲线样品。
  5. 如果不需制作标准曲线,只需将阳性对照稀释到1×10E5拷贝/μL。

三、试剂配制(试剂准备区):根据待检样品数量准备相应的qPCR管,并参照详细说明书添加各成分。

四、添加模板(模板添加区):分别向qPCR管中加入2μL模板,顺序为阴性对照、待测样品、阳性对照,随后离心30秒以确保均匀混合。

五、扩增反应(扩增及产物分析区):将PCR管放置于扩增仪器中,根据说明书设定扩增程序。

六、结果分析:

如果制作了标准曲线,则以阳性对照浓度的log值为横坐标,Ct值为纵坐标绘制标准曲线,并推算样品DNA浓度。如果未制作标准曲线,按以下标准评估结果:阳性对照的Ct值应<30,呈现明显的S型曲线;阴性对照则应Ct值为38或没有Ct值;待测样品的Ct值<35表明阳性,Ct值在35-38范围需进行复检。

运输与保存:本产品需低温运输,建议在-20℃条件下保存,保质期为一年。同时,阳性对照应独立存放,避免与其他试剂污染。

选择人生就是博-尊龙凯时,为您的科研提供全面保障。

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