人生就是博-尊龙凯时推出的本款试剂盒是基于探针法荧光定量PCR原理研发的，具备多个显著特点：

产品特点

1. 即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，即可开始检测。
2. 高灵敏度：经过优化的引物及其他组分，显著提升了检测灵敏度。
3. 附赠阳性对照：有效区分假阴性样品。
4. 高特异性：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，避免与其他生物样本DNA的交叉反应。
5. 灵活检测：可用于定性和定量检测，在定量检测中，线性范围至少为5个数量级。
6. 支持多次检测：此产品可完成50次每次20μL的探针法荧光定量PCR反应。
7. 专为科研设计：本试剂盒仅供科研使用。

使用方法

一、样本DNA提取

用户可根据自身需求选用纯化样品DNA的方法，本试剂盒与市面上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

（为避免污染，请在独立区域操作以下步骤。）
1. 标记6个离心管，分别标记为7、6、5、4、3、2。
2. 在每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 将5μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）加入到7号管中，震荡均匀，得到1×10⁷拷贝/μL的标准样品。
4. 按上述方式依次将阳性对照稀释，直到得到6个不同稀释度的标准曲线样品。
如果不需要标准曲线，只需将阳性对照稀释至1×10⁵拷贝/μL即可。

三、试剂配制

根据待检样品数量，准备相应的qPCR管，向各管中加入试剂，详细配方请参考说明书。

四、模板添加

向qPCR管中加入2μL模板，顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、阳性对照。然后离心30秒，开始扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管放入扩增仪器中，按照指定程序进行扩增，具体条件请参考说明书。

六、结果分析

1. 如果制作了标准曲线，使用阳性对照浓度的log值作为横轴，Ct值作为纵轴，绘制标准曲线并推算样品DNA浓度。
2. 若不制作标准曲线，依据以下标准判断结果：
- 阳性对照：Ct值<30，呈现明显的指数增长及典型的S型曲线。
- 阴性对照：Ct值=38或无Ct值，无明显的指数增长及平台期。
- 样本检测结果：Ct值<35，表明样本中检测到目标DNA，结果为阳性；Ct值=38或无Ct值，表示未检测到目标DNA，结果为阴性；Ct值在35-38之间时，需复检，如结果仍在此范围且有明显指数增长，判断为阳性，否则为阴性。

运输及保存

产品需低温运输，保存于-20℃，保质期为一年。阳性对照需单独存放，避免与其他试剂污染。

选择人生就是博-尊龙凯时的检测试剂盒，提升您的科研效率与准确性！